Sklep Logowanie
ZAWARTOŚĆ ETG WE WŁOSACH
Poprawiony (środa, 08 września 2010 14:25) Wpisany przez admin środa, 13 sierpnia 2008 11:39
Tagi: metabolity, etanol, alkohol, etg Nieoksydacyjne metabolity etanolu jako markery ostatniego picia alkoholu 235 Cylwik B., Chrostek L., Szmitkowski M. rozpoznanie nadużywania alkoholu mogłoby przyspieszyć moment wiele laboratoryjnych, biochemicznych markerów małej konsumpcji, laboratoryjne wymagają jednak zwiększenia czułości i swoistości diagnostycznej. Ich użyteczność kliniczna jest ograniczona okresem metabolity etanolu z uwzględnieniem ich przydatności jakonowych (EtG), kwasu siarkowego (EtS) oraz fosfatydyloetanol (PEth). Wartość diagnostyczna tych markerów w wykrywaniu ostatniej konsumpcji ze względu na ich czas detekcji w płynach biologicznych czyli jednym dniem a tygodniem. Czas detekcji estru po zaprzestaniu w pełnej krwi ponad 2 tygodnie. Dodatkowo EtG i FAEEs mogą być wykrywane we włosach przez kilka miesięcy, dlatego można je stosować diagnostyczną nieoksydacyjnych metabolitów etanolu potwierdzono wskaźniki picia przed zgonem) oraz w diagnostyce prenatalnej (jako wskaźniki narażenia płodu na alkohol). Słowa kluczowe: nieoksydacyjne metabolity etanolu, ostatnie picie Pol. Merk. Lek., 2007, XXIII, 135, 235 W rozpoznawaniu małego spożycia, nadużywania lub uzależnienia jego konsumpcji (tzw. state markers), które dostarczają obiektywnych dowodów picia. Stosowane powszechnie testy laboratoryjne wymagają zwiększenia czułości i swoistości okresem półtrwania, który jest determinowany szybkością kliniczną testów wpływa wiele czynników, wśród których można wymienić wiek pacjenta, płeć, stan zdrowia, zażywane Na przykład oznaczenie stężenia etanolu w surowicy po zakończeniu gamma-glutamylotransferaza (gamma-glutamyltransferase – GGT) jest testem podatnym na oddziaływanie różnego rodzaju substancji, zmieniając się pod wpływem ostrych i przewlekłych chorób wątroby, zaś transferyna ubogowęglowodanowa (carbohydrate-deficient transferrin – CDT) oraz MCV (mean corpuscular volume) są przydatne w diagnostyce efektu jego działania w organizmie. Kolejnym ograniczeniem może być wielkość konsumpcji. Ilość spożytego alkoholu musi być odpowiednio duża, aby doszło do zaburzeń i struktury niektórych związków, powodującychprzejściowe może być CDT, której stężenie w surowicy zwiększa się dopiero po spożyciu ponad 1000 g czystego etanolu w ciągu nadużywania alkoholu powinny być testami łatwo dostępnymi, do wykonania w każdym laboratorium. Obecnie poszukuje które miałyby pośredni okres półtrwania – między etanol w surowicy i moczu, metanol, wskaźnik 5-hydroksyB.Cylwik, L. Chrostek, M. Szmitkowski ponad 2 tygodnie. Dodatkowo niektóre z nich, np. EtG i FAEEs, są przez kilka miesięcy wykrywalne we włosach. ESTRY ETYLOWE KWASÓW TŁUSZCZOWYCH (FAEEs) i powstają w reakcji estryfikacji etanolu z wolnymikwasami oleinowego, linolowego, linolenowego i arachidonowego. Powstają one w narządach uszkodzonych na skutek przewlekłej konsumpcji alkoholu (wątroba, trzustka, mięsień surowicy (osoczu), włosach, smółce noworodka, tkance tłuszczowej, Wykazano, że FAEEs mogą być zarówno markerem ostatniejkonsumpcji alkoholu (tzw. marker przewlekłego uporczywego picia (tzw. wskaźnik długotrwały). od zaprzestania picia w surowicy osób pijących okazjonalnieoraz do 44 godzin u zasługuje fakt, że wraz ze zwiększaniem stężenia alkoholuwe krwi dochodzi do Wykazano, że stężenie FAEEs u osób przewlekle nadużywających alkoholu jest istotnie większe niż u osób krótkotrwale go palmitynowego, stearynowego, oleinowego, linolowego i arachidonowego, przy czym najczęściej występował ester palmitynowyoraz oleinowy [17]. Ester oleinowy stężeniu niż palmitynowy, a stężenie estrów stearynowegoi palmitynowego przewlekłe picie alkoholu od okazjonalnego jest więc nie tylko wartość stężenia FAEEs w surowicy, ale i typ dominującego estru. Stężenie FAEEs w surowicy krwi nie zależy od płci. Po przeliczeniu ilości spożytego alkoholu na wagę ciała niż u kobiet [27]. Nie zależy przy tym od rodzaju napoju alkoholowegooraz Ze względu na kumulację estrów we włosach (kilka miesięcy)mogą etanolu [31]. W badaniach przeprowadzonych w grupie pacjentów testów: GGT (72,2%), %CDT (47,1%) i MCV (38,8%) [31]. (FAEEs) a estrem kwasu palmitynowego, podobnie jak między FAEEs a fosfatydyloetanolem we krwi. Nie stwierdzono natomiast istotnej korelacji między stężeniem tych estrów we włosach a wielkością konsumpcji alkoholu w ostatnim miesiącu przed badaniem, stężeniem etanolu we krwi oraz wartością być również przydatnym markerem nadmiernego przewlekłego picia, różnicującym abstynentów i pijących okazjonalnie od Wykrywanie i oznaczanie estrów etylowych kwasów tłuszczowych alkoholu przez kobiety ciężarne, które jest skrzętnie ukrywanez obawy przed że u płodów występuje mała aktywność enzymów podatne na uszkodzenia. Może to być powodem rozwojutzw. alkoholowego effects – FAE) [7]. Wykonywany zazwyczaj pomiar stężenia etanolu we krwi lub wydychanym powietrzu, ze względu kobiety ciężarne. Większe znaczenie ma określenie czasu ekspozycji tryptofol/kwas 5-hydroksyindolooctowy (5-HTOL/5-HIAA, 5-hydroxytryptophol/5-hydroxyindole acetic acid), a markerów dniem a tygodniem. ustroju odgrywają przemiany metaboliczne, które przebiegają z: moczem (0,5-2%), wydychanym powietrzem (1,6-6%), potem (maks. 0,5%), śliną i łzami [16]. Proces oksydacyjny,w którym utlenieniu ulega niej trzy główne układy metaboliczne: dehydrogenazę alkoholową (ADH), mikrosomalny system utleniania etanolu (MEOS) oraz katalazę [9]. Proces oksydacyjny przebiega z alkoholu, polega na tworzeniu estrów etanolu z kwasami tlenowymi organicznymi i nieorganicznymi. Nieoksydacyjne przemiany etanolu zachodzą w tych narządach, które najczęściej ulegają uszkodzeniu na skutek nadużywania przemiany etanolu [19]. Szlak nieoksydacyjny, mimo metabolizowania tylko niewielkiej części dawki alkoholu, jest niedawne wypicie alkoholu. Celem niniejszej pracy jest omówienie nowych, nieoksydacyjnych metabolitów etanolu jako markerów ostatniej konsumpcji alkoholu. Należą do nich estry etylowe kwasów tłuszczowych (fatty acid ethyl esters – FAEEs), ester etylowy kwasu glukuronowego (ethyl glucuronide – EtG), ester etylowy kwasu siarkowego (ethyl sulphate – EtS) oraz fosfatydyloetanol (phosphatidyl ethanol – PEth). Dodatni wynik testu moczu uzyskuje się w odpowiednim czasie od chwili zakończenia ostatniej konsumpcji (tzw. time window). Dla FAEEs w surowicy wynosi on 24 godziny, dla EtG w moczu – 5 dni, dla EtS w moczu – półtora dnia, a dla PEth w krwi pełnej – Ryc. Metabolizm oksydacyjny i nieoksydacyjny alkoholu etylowego w organizmie człowieka Fig. Oxidative and nonoxidative metabolism of ethanol in human body Metabolizm oksydacyjny – utlenianie etanolu Alkohol etylowy Aldehyd octowy Dehydrogenaza alkoholowa Mikrosomalny system utleniania etanolu (MEOS) Katalaza Metabolizm nieoksydacyjny – estryfikacja etanolu Syntaza FAEEs UDP-glukuronylotransferaza Sulfotransferaza Fosfolipaza D Estry etylowe kwasów Ester etylowy kwasu glukuronowego (EtG) Ester etylowy kwasu siarkowego (EtS) Fosfatydyloetanol (PEth) pomiar stężenia FAEEs. Wśród tych estrów najbardziej przydatnymprenatalnym markerem ekspozycji jest ester kwasu linolowego i palmitynowego [3]. Jak wykazują badania wstępne przeprowadzone na zwierzętach, w materiale sekcyjnym pobranym z tkanki wątrobowej i tłuszczowej [21]. Stwierdzono, że FAEEs są wykrywalne w tkance tłuszczowej do 12 godzin po śmierci zwierząt, a w tkance sekcyjnym u ludzi mogą być także pośmiertnym markerem picia krwi sekcyjnej na zawartość alkoholu nastręcza wiele trudności. Z jednej strony dochodzi do zmniejszenia jego stężenia alkoholu endogennego z glukozy obecnej w gnijącej stanu trzeźwości osób zmarłych, poszukuje się innych materiałów poza krwią (np.: tkanka wątrobowa, tłuszczowa), Wykazano, że wartość FAEEs ponad 10 000 pmol/g wątroby, w tym estru etylowego kwasu arachidonowego ponad 200 pmol/g wątroby lub tkanki tłuszczowej, wskazuje na spożywanie alkoholu przez pacjenta przed zgonem [21]. ESTER ETYLOWY KWASU GLUKURONOWEGO (EtG) kwasem glukuronowym (glukuronian – UDP), katalizowanej etanolu u człowieka i 0,5-1,5% u zwierząt [8]. EtG jest związkiem wykrywanym we krwi i moczu jedynie u osób spożywających alkohol [8, 24, 34, 35]. Dodatkowo może być obecny we włosach [15], a także w innych (poza już wymienionymi) płynach ustrojowych [22]. Od 2003 r. jest testem komercyjnym stosowanym Pozytywny wynik oznaczania EtG w moczu lub w surowicy jednoznacznie wskazuje, że dana osoba ostatnio spożywała daje wynik negatywny. Czas detekcji EtG w surowicy lub bardzo małych dawek (około 7 g) jest wykrywany w moczudo [27]. Z kolei przy większej konsumpcji (25-41,5 g) EtG możnawykryć 6,5 godzin [8]. U osób zdrowych, pijących umiarkowane ilości estru w surowicy wynosi około 2,5 godziny [23]. U osób uporczywie do 36 godzin, a w moczu do 3-5 dni od ostatniego picia [24]. wynosi 1,4-71,0 mg/l i wykazuje dużą zmienność wewnątrzosobniczą [22]. Nie ma przy tym związku ze stężeniem alkoholu w moczu [4]. Glukuronid etylu jest czulszym Na oznaczanie EtG w moczu mogą mieć wpływ następujące choroby nerek oraz ilość spożytego alkoholu w ostatnim miesiącu przed badaniem [35]. Stężenie tego estru w moczu nie papierosów, nawodnienia organizmu, rasy oraz wieku, w którym dana osoba rozpoczęła regularne picie. Czułość i swoistość diagnostyczna tego badania dla pacjentów pijących zaś i (lub) uzależnionych wartości te były mniejszei Porównanie współzależności oznaczania EtG w moczu zinnymi markerami konsumpcji alkoholu znamiennego związku ze wskaźnikiem 5-HTOL/5-HIAA, CDT, oraz ilością alkoholu spożytego w miesiącu poprzedzającym badanie [33]. Porównanie przydatności diagnostycznej EtG i kliniczną ma glukuronid etylu. alkoholu jest jego czas detekcji w moczu, wynoszący między wskaźnikami o krótkim i długim okresie półtrwania. stanu picia. W programach leczenia uzależnień może być takiej terapii u kilku stwierdzono obecność EtG, co jednoznacznie [25]. Kolejnym przykładem może być kontrola abstynencjiw grupie osób w przypadku których podejmowano próby ujawnienia Z przebadanych 146 próbek moczu w 14 stwierdzono obecność EtG. Wszyscy ci pacjenci potwierdzili w wywiadzie, że badaniem. Dla porównania przeprowadzono test na zawartość alkoholu w moczu oraz w wydychanym powietrzu. Dodatni wynik stwierdzono tylko w jednym przypadku. Badanie wszystkich pacjentów, a CDT nie przekraczał wartości referencyjnych[34]. Wyniki przedstawionych picia alkoholu. FOSFATYDYLOETANOL (PEth) Fosfatydyloetanol (PEth) powstaje w wyniku enzymatycznego Wynik badania na obecność PEth we krwi pełnej zależy umiarkowanej dawce 32-47 g przez osoby zdrowe daje wynik do trzech tygodni i podobnej dawce 28-42 g/dzień związek nie jest wykrywalny. Natomiast zwiększanie wypijanych 2,1 mmol/l) [29]. Przyjmuje się, że wartość progowa spożywanego U przewlekle nadużywających alkoholu stężenie PEth we krwi wynoszącym cztery dni [28]. W grupie uzależnionych mężczyzn badania był pozytywny przez następne dwa tygodnie [12]. Wcześniejsze badania dotyczyły oznaczania PEth we krwi pełnej, chociaż krwinki czerwone również mają zdolność metabolizowania alkoholu do fosfatydyloetanolu. U przewlekle nadużywających alkoholu stężenie PEth w erytrocytach może być nawet podobne do jego stężenia we krwi pełnej (1,9 vs. 2,5 mmol/l) [28]. oznaczania PEth w materiale sekcyjnym, stwierdzając obecność metabolitu we krwi oraz we wszystkich narządach, co osoby w chwili zgonu [2]. SIARCZAN ETYLU (EtS) Siarczan etylu (EtS) powstaje w wyniku enzymatycznej reakcji katalizowanej przez sulfotransferazę [32]. Odsetek etanolu wydalany w moczu w postaci siarczanu etylu jest Badania nad siarczanem etylu jako nowym, potencjalnym markerem ostatniej konsumpcji etanolu, podobnie jak glukuronidu – etylu. Stwierdzono, że u osób zdrowych 18 g) w dniu poprzedzającym badanie pozytywny wynik testuna a po przyjęciu 49 g – przez 36 godzin [11]. Oznacza to, że EtS jest wykrywany w moczu o około dobę (16-27 godzin) którym osoby zdrowe przyjmowały od 9 do 20 g etanolu, EtS glukuronid etylu) [32]. Dla porównania, etanol w moczu był obecny tylko przez około 5 godzin. PODSUMOWANIE z organizmu odgrywają przemiany metaboliczne obejmujące przede wszystkim szlak oksydacyjny (tlenowy), w mniejszym stopniu – nieoksydacyjny (beztlenowy). Droga zawiera trzy układy metabolizujące etanol: dehydrogenazęalkoholową tworzeniu estrów etanolu z kwasami tlenowymi. W pracy omówiono nieoksydacyjne metabolity alkoholu etylowego, alkoholu. Należą do nich estry etylowe: kwasów tłuszczowych (FAEEs), kwasu glukuronowego (EtG), kwasu siarkowego tych markerów w ujawnianiu niedawnej konsumpcji laboratoryjnych ze względu na ich pośredni okres półtrwania w płynach biologicznych, wypełniający przedział czasowy między okresem półtrwania markerów krótkotrwałych (etanol, metanol, wskaźnik HTOL/HIAA) i markerów a tygodniem. Czas detekcji estru od chwili zakończenia tzw. time window, wynosi dla FAEEs 24 godziny (w surowicy), EtG i FAEEs we włosach (kilka miesięcy) metabolity te etanolu. Przydatność diagnostyczną nieoksydacyjnychmetabolitów alkoholu etylowego abstynencję), w medycynie sądowej (ocena stanu trzeźwości osoby w chwili zgonu) oraz w diagnostyce prenatalnej (markery ekspozycji płodu na alkohol). PIŚMIENNICTWO in human and rat blood. Alcohol Alcohol., 2004, 39, 8-13.2. Aradottir S., Seidl S., Wurst F.M. i wsp.: organs and blood: a study on autopsy material and influences by storage 3. Bearer C.F., Lee S., Salvator A.E. i wsp.: Ethyl linoleate in meconium: abiomarker for prenatal ethanol exposure 23, 487-493. in two successive urinary voids from drinking drivers: relationship to creatinine Int., 2003, 133, 86-94. Alcohol Clin. Exp. Res., 2004, 28, 1102-1106. 6. Conigrave K.M., Degenhardt L.J., Whitfield B. i wsp.: CDT, GGT, andAST as markers of alcohol use: the WHO/ISBRA collaborative project Alcohol. Clin. Exp. Res., 2002, 26, 332-339. Biochem., 2003, 36, 9-19. 2002, 26, 201-204. intake. Studies on possible causes for false-negative or false-positive Dependence Research, Karolinska Institutet, Stockholm 2006, Sweden. 10. Doyle K.M., Bird D.A., al. Salihi S. i wsp.: Fatty acid ethyl esters are presentin serum after ethanol ingestion ethyl sulfate – a new marker for alcohol consumption – by liquid-chromatography/ Mass Spectrom., 2004, 15, 1644-1648. 12. Hansson P., Caron M., Johnson G. i wsp.: Blood phosphatidylethanol asa marker of alcohol abuse: levels in alcoholic males during withdrawal Alcohol. Clin. Exp. Res., 1997, 21, 108-110. 29, 270-274. 2003, 66, 15-32. 15. Janda I., Weinmann W., Kuehnle T. i wsp.: Determination of ethyl glucuronidein human hair by SPE and LC-MS/MS 16. Jones A.W.: Biochemistry and physiology of alcohol: application to forensicscience and toxicology of alcohol. Lawyer & Judges Publishing Co., Tuson 1996, 85. of alcohol abuse and alcoholism. Alcohol, 2004, 34, 151-158.18. Lesch O.M., Walter H., Antal J. i wsp.: 1996, 31, 265-271. 19. Lieber C.S.: Hepatic and metabolic effects of ethanol: pathogenesis andprevention 20. Moore C., Jones J., Lewis D. i wsp.: Prevalence of fatty acid ethyl estersin meconium specimens fatty acid ethyl esters obtained at autopsy are postmortem markers for premortem ethanol intake. Clin. Chem., 2002, 48, 77-83.22. Schloegl H., Rost T., Schmidt W. i wsp.: in rib bone marrow, other tissues and body liquids as proof of alcohol in serum of human volunteers, teetotalers, and suspected drinking drivers. J. Forensic Sci., 1997, 42, 1099-1102.24. Seidl S., Wurst F.M., Alt A.: recent alcohol consumption. Addict. Biol., 2001, 6, 205-212.25. Skipper G.E., Weinmann W., Thierauf A. i wsp.: to identify alcohol use by health professionals recovering from affecting the quantification of fatty acid ethyl esters in plasma and serum samples. Clin. Chem., 1999, 45, 2183-2190.27. Stephanson N., Dahl H., Helander A. i wsp.: Ther. Drug Monit., 2002, 24, 645-651. 28. Varga A., Hansson P., Johnson G. i wsp.: Normalization rate and cellularlocalization of phosphatidyloethanol in whole blood from chronic alcoholics Clin. Chim. Acta., 2000, 299, 141-150. as a marker of ethanol consumption in healthy volunteers: comparison 30. Wildt de S.N., Kearns G.L., Leeder J.S. i wsp.: Glucuronidation in humans.Pharmacogenetic and developmental aspects 1999, 36, 439-452. ethyl esters in hair of alcoholics: comparison to other biological state markers 32. Wurst F.M., Dresen S., Allen J.P. i wsp.: Ethyl sulphate: a direct ethanol metabolitereflecting recent alcohol consumption Use and Dependence Investigators: The ethanol conjugate ethyl glucuronide Exp. Res., 2002, 26, 1114-1119. covert alcohol use not detected by standard testing in forensic psychiatric inpatients. Alcohol Clin. Exp. Res., 2003, 27, 471-476.35. Wurst F.M., Wiesbeck G.A., Metzger J.W. i wsp.: and the influence of various parameters on ethyl glucuronide levels in 28, 1220-1228. Otrzymano 12 kwietnia 2007 r.
Adres poczty elektronicznej jest chroniony przed robotami spamującymi. W przeglądarce musi być włączona obsługa JavaScript, żeby go zobaczyć.